Identification bactérienne
La coloration différentielle des bactéries peut fournir des informations préliminaires lorsqu’un technicien médical tente d’identifier un type inconnu de bactérie responsable de l’infection. Des informations de base, telles que si un organisme est Gram positif ou Gram négatif , sont utilisées pour décider quel test diagnostique sera utilisé pour déterminer le genre et l’espèce de la bactérie en question.
L’API 20E de bioMerieux
Si le microbe est une bactérie en forme de bâtonnet Gram négatif (bacille), l’un des tests de diagnostic les plus fréquemment utilisés est la bandelette de test API 20E fabriquée par bioMerieux, Inc., une société de biotechnologie qui produit une variété de bandelettes de test différentes pour l’identification de la levure. , Le staphylocoque et les bactéries anaérobies, pour n’en nommer que quelques-uns.
Le système API 20E consiste en une bande en plastique de 20 tubes à essai miniaturisés (cupules) individuels contenant chacun un réactif différent utilisé pour déterminer les capacités métaboliques et, finalement, le genre et les espèces de bactéries entériques de la famille des Enterobacteraceae.
Fonctionnement du système API 20E
Chargement des cupules
Chaque cupule est inoculée avec une suspension saline d’une culture bactérienne pure, réhydratant le réactif séché dans chaque tube. Certains des tubes sont à remplir complètement (tests CIT, VP et GEL), tandis que d’autres sont complétés d’huile minérale pour que des réactions anaérobies (réactions se produisant en l’absence d’oxygène) puissent être effectuées (tests ADH, LDC , ODC, H2S, URE).
Incubation de l’API 20E
La bande est ensuite incubée dans une petite chambre d’humidité en plastique pendant 18 à 24 heures à 37 ° C. Les bactéries vivantes produisent des métabolites et des déchets dans le cadre de l’activité d’une cellule fonctionnelle. Les réactifs dans les cupules sont spécifiquement conçus pour tester la présence de produits du métabolisme bactérien spécifiques à certains types de bactéries.
Lecture des résultats de l’API 20E
Après incubation, chaque tube (un test individuel) est évalué pour un changement de couleur spécifique indiquant la présence d’une réaction métabolique qui jette une lumière sur l’identité des microbes. Une partie du contenu de la cupule change de couleur en raison des différences de pH, d’autres contiennent des produits finis qui doivent être identifiés à l’aide de réactifs supplémentaires.
Le code secret de l’API 20E
L’interprétation des 20 réactions, en plus de la réaction d’oxydase (qui se fait séparément), est convertie en un code à sept chiffres, un processus qui ressemble beaucoup au décodage d’un message avec un anneau décodeur d’espionnage super secret. Le technicien peut alors rechercher le code dans un énorme manuel qui a les noms des espèces bactériennes associées à chaque chaîne de nombres à sept chiffres.
Ressources supplémentaires API20E et microbiologie
Pour plus d’informations sur les spécificités de la réalisation du test API 20E, consultez l’explication étape par étape dans le manuel du laboratoire virtuel de Jackie Reynolds du Richland College. Pour plus d’informations sur la microbiologie, consultez la classe de microbiologie virtuelle SPO .
Autres sources
Willey, J., Sherwood, L. et Woolverton, C. (2008) Prescott, Harley & Klein’s Microbiology 7th Edition . McGraw Hill.